حسینی و بگی (۱۳۹۱) در مطالعه­­ای تحت عنوان فرهنگ و فرزندآوری: بررسی تمایلات باروری زنان کُردِ شهر مهاباد که با حجم نمونه­ ۷۰۰ خانوار در فروردین ماه ۱۳۹۱ انجام گرفت به این نتیجه رسیدند ۴/۶۱ درصد زنان قصد بر توقّف فرزندآوری دارند. بررسی تمایلات فرزندآوری زنان بر حسب شمار فرزندان در حال حاضر زنده­ی آن­ها گویای آن است که ۳/۳۹ درصد زنان بدون فرزند یا با یک فرزند، ۷/۷۷ درصد زنان صاحب دو تا سه فرزند و ۸۶ درصد زنان صاحب بیش از سه فرزند تمایل ندارند که فرزند دیگری داشته باشند. تحلیل­های دو متغیّره نشان داد که تفاوت معنی­داری بر حسب تمایلات فرزندآوری در میان زنان با ویژگی­های اقتصادی – اجتماعی، جمعیّتی و فرهنگی متفاوت وجود دارد. نتایج نشان داد که مشخّصه­های فرهنگی به تنهایی نمی ­توانند نقش تعیین­کننده ­ای در پیش ­بینی احتمال تمایل نداشتن به فرزندآوری داشته باشند. در واقع، ترکیبی از مشخّصه­های فرهنگی، اقتصادی – اجتماعی و جمعیّتی تبیین بهتری از تمایلات فرزندآوری زنان به دست می­دهد.
حسینی و بگی ­(۱۳۹۱) در مطالعه­ خود تحت عنوان «استقلال زنان و کنش​های باروری در میان زنان کُردِ شهر مهاباد» که با حجم نمونه­ ۷۰۰ خانوار در فروردین ۱۳۹۱ انجام گرفت به این نتیجه رسیدند که زنان مورد بررسی از استقلال نسبی در همه​ی شاخص​های مرتبط با استقلال زنان برخوردارند. بر اساس این بررسی، کمی بیش از ۶۱ درصد زنان اظهار داشته​اند که تمایل ندارند فرزند دیگری داشته باشند. در میان آن​هایی که تمایل به ادامه­ فرزند​آوری دارند، نزدیک به۷۰ درصد شمار فرزندان ایده​آل​ برای یک خانواده را دو فرزند می­دانند. نتایج تحلیل طبقه ­بندی چندگانه^[۶] نشان داد که ایده​آل​ها وتمایلات فرزند​آوری زنان به ترتیب از شاخص​های مستقیم و غیرمستقیم استقلال زنان تأثیر می­پذیرند. علاوه بر این، اگرچه رفتار باروری زنان از شاخص­ های سه گانه­ی استقلال تأثیر می­پذیرد، اما استفاده از وسایل پیشگیری از بارداری در کنار سایر متغیرها، نقش تعیین­کننده​ای در تبیین رفتار باروری زنان دارد. با توجه به نتایج این تحقیق، انتظار نمی​رود سیاست­های جمعیّتی در راستای تشویق موالید منجر به افزایش باروری در همه لایه­ های اجتماعی شود.

نتایج بررسی حسینی و عباسی شوازی ­(۱۳۸۸) پیرامون تغییرات اندیشه​ای و تأثیر آن بر رفتار و ایده­آل​های باروری زنان کُرد و تُرک که با حجم نمونه ۷۶۸ خانوار در آذربایجان غربی به روش پیمایشی انجام گرفت، از عمومیت تغییرات اجتماعی و تحوّلات خانواده در میان گروه​های قومی مورد مطالعه به ویژه در گروه​های هم دوره‌ی اخیرتر ازدواج حکایت دارد. بر اساس این مطالعه، تغییرات اندیشه​ای محسوس در زمینه­ ازدواج و فرزندآوری و نیز رفتار و ایده​​آل​های باروری زنان گروه​های قومی به وجود آمده است. نتایج گویای آن است که تغییرات اجتماعی و تحوّلات خانواده ملازم با تغییر در نگرش​ها و ایستارهای مرتبط با ازدواج و فرزندآوری و در نهایت رفتار و ایده​آل​های باروری است.
عباسی­شوازی و همکاران ( ۱۳۸۱) در مطالعه​ای پیرامون دیدگاه زنان در مورد رفتارهای باروری در استان یزد، با بهره گرفتن از رویکرد کیفی اکتشافی سعی کردند نگرش​ها و ایده​آل​های زنان را در مورد مباحث و موضوعات مختلف مرتبط با باروری را بررسی کنند تا بتوانند پرسشنامه​ای برای طرح تحولات باروری تنظیم کنند. به­ طور خلاصـــه، نتایج این تحقیق نشان داد که در حال حاضر نگرش و رفتار باروری در همه گروه​های سنی به هم نزدیک شده است و تفاوت قابل توجّهی بین گروه​های مختلف اجتماعی از جمله زنان روستایی و شهری و باسواد و بی​سواد وجود ندارد. به عبارتی، تحقیق حاضر همگرایی رفتارهای باروری در جامعه­ مورد مطالعه را تأیید می​کند.
میرمحمد صادقی، توکّلی و واحد سعید (۱۳۸۹) در مطالعه­ ای که پیرامون عوامل اجتماعی ـ اقتصادی و جمعیت­شناختی مؤثّر بر باروری در مناطق روستایی شهر نجف آباد که با حجم نمونه ۴۱۵ زن شوهردار روستایی که در وضعیّت اولین ازدواج و دارای حداقل یک فرزند زنده بودند،­ انجام گرفت. آن​ها به این نتیجه رسیدند که در برخی از سنین طول دوره ازدواج، تعداد مرگ­و­میر فرزندان، تعداد سقط جنین و وسعت اراضی قابل استفاده روستا ( تخمینی از اندازه) تأثیر مثبت بر باروری دارد، در صورتی که سن در اولین زایمان، فواصل زایمان، سطح تحصیلات زن و شوهر و دارا بودن بیمه تأثیر منفی بر باروری دارند.
ضیایی بیگدلی، کلانتری و علیزاده اقدم (۱۳۸۸) در مطالعه​ای پیرامون رابطه بین میزان باروری کل با توسعه اقتصادی ـ اجتماعی که با روش کتابخانه​ای و تحلیل­ثانوی در سطح ملّی انجام گرفت به این نتیجه رسیدند که هر اندازه سطح توسعه یافتگی کشوری بالا باشد به همان اندازه میزان زاد و ولد و در نتیجه رشد جمعیت آن کشور کمتر است. در حقیقت می­توان گفت که بهتری ن قرص ضد بارداری، توسعه اقتصادی است. بر این اساس رابطه بین توسعه­یافتگی و نرخ زاد و ولد یک رابطه معکوس می­باشد، و در مناطق محروم جهان و در سطح ایران و استان​های کشور این رابطه به خوبی نمایان است، و استان­های برخوردار از رفاه و توسعه شاهد میزان رشد جمعیت کمتری هستند.
عباسی شوازی، حسینی چاووشی و مک دونالد (۱۳۸۳) در مطالعه​ای پیرامون همگرایی ایده­آل​های باروری در ایران ( مطالعه مقایسه​ای جوانان و نسل مسن­تر) که بین دو نسل زنان متاهل ۲۹-۲۰ ساله و نسل قبلی زنان ۴۹-۴۰ ساله انجام گرفت به این نتیجه رسیدند که در هر دو نسل نگرش مشابهی نسبت به سن ازدواج و باروری وجود دارد، با این حال تفاوت معنی­داری بین نگرش​های­شان نسبت به ایده​آل باروری در زمان ازدواج وجود داشت، این ممکن است ناشی از شیوع بالای حاملگی ناخواسته در میان نسل قدیمی­تر یا معادل ایده​آل باروری پایین در میان نسل مسن­تر باشد. همچنین استفاده از برنامه ­های تنظیم خانواده قبل از اولین حاملگی برای دو نسل نیز متفاوت بود، بر این اساس با توجه به اهمیّت ساختار سنی جمعیت جوان ایران، برنامه ­های تنظیم خانواده^[۷] باید شامل برنامه​های باشد که موافق جوانان باشد.
محمودیان، و رضائی (۱۳۸۹) در مطالعه​ای تحت عنوان زنان و کنش کم‌فرزند آوری ­­(­مطالعه موردی زنان کُرد) که با رویکرد کیفی (مصاحبه حضوری از ۳۵ نفر از زنان کُرد در شهر سقز) انجام گرفت، به این نتیجه رسیدند که کم فرزند​آوری در این جامعه به​عنوان یک کنش اجتماعی معنادار از رواج و شیوع گسترده​ای برخوردار است و در قالب نوعی گفتمان بر نظام معنایی و کنشی افراد و خانوادها حاکم است. برآیند کلیه​ی مفاهیم و مقولات به دست آمده از این مطالعه یک مقوله هسته​ای دو وجهی به نام کم فرزندی به مثابه قاعده­مندسازی( ارتقاء سوژه) است که بازنمایی وضعیّت حاکم بر این جامعه در حیطه­ی فرزند​آوری است. خود حمایتی مهم‌ترین مقوله و معنای بی‌ذهنیتی زنان در استدلال برای‌کم‌فرزندآوریشان است. یعنی پیش فرض اساسی در کنش کم‌فرزند‌آوری زنان در این منطقه حمایت از خودِ جسمانی، اجتماعی و روانی است. بر این اساس با توجه به پایین بودن باروری در میان هر دو نسل استدلال می​شود که ایران ممکن است کاهش باروری بیش​تری را تجربه کند و به احتمال زیاد به جرگه​ی کشورهای بپیوندد که دارای باروری پایین هستند.
عباسی شوازی و حسینی (۱۳۸۶) در مطالعه خود تحت عنوان تفاوت‌های قومی باروری در ایران: روندها و عوامل مؤثر بر آن نشان دادند که گروه ­های قومی در طول دوره­ گذار باروری، سطوح متفاوت امّا روندهای باروری مشابهی با سطوح و روندهای ملّی تجربه کرده ­اند. بر اساس این بررسی همگرایی باروری گروه ­های قومی در ایران پدیده جدیدی است که از سال‌های میانه دهه­ ۱۳۷۰ پدیدار گشته است.

۲-۲) تحقیقات خارجی

سیباندا^[۸] در تحقیق خود به بررسی عوامل بینابینی کاهش باروری کمتر از حدِّ جایگزینی در آدیس بابا پرداخته است. بین سال‌های ۱۹۹۰ تا ۲۰۰۰، نرخ باروری کل از ۱/۳ به ۹/۱ در برابر هر زن، کاهش یافت. نکته قابل توجه این بود که این کاهش باروری در حالی روی داد که برنامه تنظیم خانواده قوی و مؤثری در سطح ملی اجرا نمی‌شد. نتایج بررسی نشان داد که نسبت زنان ازدواج کرده در گروه‌های مختلف سنی، کاهش پیدا کرده است. اشتغال پایین و هزینه نسبتاً بالای مسکن، از جمله عواملی بودند که در به تعویق انداختن ازدواج و کاهش باروری نکاحی، تأثیر داشتند (سیباندا، ۲۰۰۳).
باربر و آکسین^[۹] (۲۰۰۴) در تحقیق خود تحت عنوان ایده​های جدید و محدودسازی باروری با تأکید بر نقش رسانه­های جمعی، با حجم نمونه ۱۰۹۱ زوج متأهل (۵۴-۲۵ ساله) با حداقل داشتن یک فرزند، که در نپال انجام دادند به این نتیجه رسیدند که این افراد حتّی قبل از ازدواج­شان، ​وقتی که در معرض استفاده از رسانه​های جمعی بوده​اند، تصمیم بر آن داشته​اند که بعد از ازدواج استفاده از روش های پیشگیری را در فرایند باروری خود رعایت کنند، بر این اساس همبستگی مثبت و قوی بین قرار گرفتن در معرض استفاده از رسانه​ها و اندازه­ ایده​آل باروری​خانواده وجود دارد. همچنین، این افراد خانواده­های کوچک­تری را ترجیح می​دهند و ترجیح جنسی به ویژه نسبت به پسران وجود نداشت و از تأثیرگذارترین اثر رسانه​ها​ی جمعی می­توان به تغییر در نگرش و رفتار زنان اشاره کرد.
مرتی^[۱۰] در پژوهشی تحت عنوان تغییرات باروری در آسیا و آفریقا عقیده دارد، در دو تا سه دهه گذشته تغییراتی شدید در میزان باروری آسیا و آفریقا مشاهده شده است. به‌نظر محقق، این تغییرات عمدتاً به عللی از قبیل دسترسی به داده‌های جدید و امکان ارزیابی نتایج باروری بوده است. مرتی، در تحقیق خود به بررسی تأثیر متغیرهای مستقلی مانند تحصیلات زنان، کاهش مرگ ومیر کودکان، شهرنشینی، گسترش وسایل ارتباط جمعی و فرهنگ مدرن مصرف گرایی، در کاهش باروری پرداخته است. به‌نظر محقق، تحصیلات زنان در هند، یک متغیر مهم تبیین کننده رفتار باروری در مقایسه با سایر متغیرها بوده است (مرتی، ۲۰۰۲).
باشیری^[۱۱] (۲۰۰۷) در تحقیق خود تحت عنوان اثرات نوسازی بر باروری مطلوب که با حجم نمونه ۱۵۵۷۳ نفر از زنان یکبار ازدواج کرده ۴۹-۱۵ ساله در سراسر مصر انجام داد، به این نتیجه رسید که محل اقامت فرد و سطوح مختلف نوسازی نقش مهمّی در تبیین تفاوت­های منطقه​ای رفتار باروری دارند. همچنین ترکیب خانواده یک اثر مثبت بر باروری دارد و یک تمایل قوی در خانواده​های مصری برای داشتن دو فرزند و دست کم یک پسر وجود داشت، اما با توجه به آنکه نقش نوسازی در دو سطح اقتصادی ـ اجتماعی مورد بررسی قرار گرفته است، متغیرهای نوسازی در سطح فردی نقش چندانی بر میل به باروری نداشتند و سطح توسعه اجتماعی منطقه​ای مهم­تر از نوسازی اقتصادی به تبیین تقاوت​های استانی باروری و کاهش میل به کودک می ­پردازد.
لاک لند سام^[۱۲]، پلتزر و مایر (۲۰۰۵) در مطالعه​ای پیرامون ارزش­های در حال تغییر کودکان و ترجیحات آن​ها با توجه به بُعد خانواده در آفریقای جنوبی که بر روی سه گروه از مادران انجام دادند (۳۱۹ مادری که حداقل یک کودک نوجوان دارند، ۱۳۳ مادر بزرگ و ۳۶۹ مادری که یک کودک خردسال ۲ یا ۳ ساله داشته​اند، در حالی که مادربزرگ​ ها و مادران با فرزندان نوجوان به خانواده یکسانی تعلق داشته​اند و مادران با یک کودک خردسال به هیچ یک از این دو گروه مادران تعلق نداشته​اند)، به این نتیجه رسید که زنان آفریقا جنوبی یک سـاختار اجتماعی ـ عاطفی را به​عنوان ارزش​های سنتی سودگرایانه در نظر می­گیرند و ترجیحات مربوط به اندازه خانواده​های کوچک، بزرگ و ایده​آل​ در سراسر دو نسل مادر­بزرگ​ها و مادرانی که کودکان نوجوان دارند کاهش یافته است و این نتیجه کاهش آرام نرخ زاد و ولد در آفریقای جنوبی است، با این حال هنوز باروری در سطح بسیار بالای است. در نهایت برای مادران جوان ارزش کودکان به ترجیحات اندازه خانواده در پیش ­بینی رفتار مربوط می­ شود بنابراین به­ طور خاص تصمیمات باروری برای زنان آفریقای جنوبی به ارزش کودکان وابسته است.
گرستر و کاگینگ^[۱۳] (۲۰۰۷) به بررسی رابطه تحصیلات زنان و تمایل آن​ها به داشتن فرزند دوم پرداخته‌اند. سؤال آن​ها در بررسی انجام شده این بود که اگر زنان با تحصیلات بالاتر زمان بیش​تری برای فرزند​آوری داشتند، تمایل­شان به داشتن فرزند افزایش می­یافت؟ در حقیقت آن​ها این فرض را دارند که زنان با تحصیلات بالا مدت زمان بیش​تری از دوره توانایی باروری خود را در سیستم آموزشی می­گذرانند، بنابراین فرصت کمتری برای آوردن فرزند دارند. آن​ها به این نتیجه رسیدند که زنان با تحصیلات بالاتر تمایل به باروری بیش​تری داشته​اند و زنان بدون تحصیلات و یا با تحصیلات متوسط باروری کمتری داشته​اند.
حسن و اوزمان^[۱۴] در مطالعه‌ای با عنوان فاکتورهای اثر گذار بر رفتار باروری در بنگلادش، یک رویکرد احتمالی، به بررسی رفتار باروری زنان در بنگلادش پرداخته‌اند. بر اساس نتایج این مطالعه، میانگین فرزندان، ۵/۲ فرزند برای هر زن بوده است. به‌نظر محققان متغیرهای سن، سن اولین ازدواج، وضعیت تأهل، شغل، درآمد ماهیانه خانواده، استفاده از وسایل پیشگیری، تصمیم‌گیری برای خواستن بچه دیگر، تحصیل و مذهب به‌طور مستقیم یا غیر مستقیم بر رفتار باروری تأثیر گذاشته‌اند. با اتخاذ روش احتمالی (رگرسیون لجستیک)، محققان نتیجه گرفته‌اند که سه متغیر سن اوّلین ازدواج، استفاده از وسایل پیشگیری و تصمیم‌گیری برای خواستن بچه دیگر، مهمترین متغیرهای تأثیرگذار بر رفتار باروری بوده‌اند (حسن و اوزمان، ۲۰۰۸).
هاگون و مورگان^[۱۵] (۲۰۰۵) به بررسی تمایل و ایده​آل اندازه خانواده در ایالات متحده آمریکا پرداختند. و برای ۱۹ پیمایش اول حجم نمونه ۱۵۰۰ نفر در نظر گرفته شده بود که مصاحبه حضوری از ایده​آل​ها و بُعد خانوار را در بر می­گرفت؛ امّا زمانی که بررسی دو سال طول کشید در سال ۱۹۹۴ این مصاحبه حضوری به ۳۰۰۰ نفر رسید که پیمایش​های سه دهه گذشته را در بر می­گرفت. آن​ها به این نتیجه رسیدند که استثناگرایی در باروری آمریکا زود گذر نیست و در حال حاضر برای بیش از دو دهه آشکار شده است و ادامه باروری در سطح جایگزینی یک پیش بینی قابل قبول در ایالات متحده می­باشد در واقع این پیش ­بینی مبتنی بر دو مشاهده می­باشد: ۱) سطوح فعلی تمایل باروری، با باروری سطح جایگزینی سازگار است. ۲) شواهد گذشته بیانگر آن است که عوامل افزایشی باروری در برابر عوامل کاهشی نسبی تمایل باروری تقریبا متعادل کننده شده است.

فصل سوم

مبانی نظری

هدف اصلی نظریه تبیین است. عموماً قدرت نظریه به قابلیت آن برای گردآوری میزان زیادی از افکار سازمان یافته اطلاعات مرتبط با یک مسئله خاص بستگی دارد و بدین ترتیب نظریه‌ها افکار را دقیق نموده و آن‌ ها را برای استفاده در یک لحظه خاص آماده می‌سازند. تبیین، هدف اصلی نظریات جامعه شناختی است. البته سودمندی نظریه جامعه‌شناسی منحصر به تبیین نیست. با دانستن نظریه، احتمال پیش‌بینی حوادث آینده امکان پذیر می‌شود(اکبری خنجی، ۱۵۸:۱۳۸۲). در این فصل تلاش می‌شود به عمده‌ترین نظریه‌های مرتبط با موضوع تحقیق اشاره شود.

۳-۱) نظریات مرتبط با موضوع

۳-۱-۱) نظریه­ گذار جمعیّت​شناختی

این نظریه برای نخستین بار در سال ۱۹۲۹ توسّط وارن تامپسون^[۱۶]ارائه شد. نظریه­ های ساختاری یا انتخاب عقلانی با نظریه­ گذار جمعیّت​شناختی پدید آمدند، ایده­ای که علی‌رغم انتقادهایی که از آن شد، هنوز مرجع اصلی برای تبیین گذار باروری است. سال­ها بحث از کاهش باروری تحت سلطه­ی نظریه­ گذار جمعیّت​شناختی بود. شنه^[۱۷]، گذار جمعیّت‌شناختی را فرایند نوسازی رفتار تولید­مثل در جمعیّت­های انسانی می­داند که طیّ دو مرحله کاهش مرگ­و­میر و سپس کنترل باروری صورت می­گیرد. بر اساس این نظریه، جوامع نوسازی را از یک رژیم پیشامدرن مرگ­و­میر و باروری بالا به یک رژیم پسامدرنی که در آن هر دو پایین هستند تجربه می­ کنند. جامع­ترین موضوع نظریه­ گذار این است که نوسازی اقتصادی فرزندآوری جوامع را طوری تغییر می­دهد که تعداد زیاد کودکان دیگر برای والدین مزیّتی نخواهد داشت. بنابراین، کاهش باروری نوعی تطابق عقلانی با تغییر در شرایط اقتصادی عینی است. در این نظریه که در طول چند دهه پارادایم غالب در جمعیّت­شناسی بود، کاهش باروری هنگامی رُخ می­دهد که فرایندی از نوسازی در اثر صنعتی شدن، شهرنشینی، تحصیلات، آزادی زنان و توسعه اقتصادی اجتماعی آغاز می­ شود. صنعتی­شدن و شهرنشینی یک شیوه­ زندگی ایجاد می­ کند که داشتن تعداد زیاد فرزند را نامطلوب می­سازد. صنعتی­شدن همچنین از طریق کاهش مرگ­و­میر، تعداد فرزندانی را که زنده می­مانند افزایش می­دهد. در نتیجه، والدین با محدودّیت­های مالی مواجه می­شوند،زیرا از طرفی پرورش فرزندان هزینه­ های سنگینی بر آن​ها تحمیل می­ کند و از طرف دیگر،منافع فرزندان کاهش می­یابد. در نتیجه، انگیزه­ آن​ها برای داشتن فرزند بیش​تر، سُست می­ شود. این محدودّیت­ها باعث می­ شود تا والدین به فکر تنظیم خانواده و کاهش بُعد خانوار بیافتند (حسینی،۱۲۱:۱۳۹۰).

۳-۱-۲) نظریه­ هزینه­ها و منافع فرزندان

لیبنشتاین^[۱۸] استدلال می­ کند که منفعت و هزینه­ فرزندان عواملی هستند که بر تصمیم‌گیری والدین در مورد ایده­آل­های باروری­شان و در نهایت شمار فرزندان تأثیر می­گذارند (شکل ۳-۱). والدین سبک سنگین می​کنند و به ارزیابی هزینه­ها و مخارج فرزندان می­پردازند. چناچه منافع داشتن بچّه بیش​تر از هزینه­ها یا مخارج فرزندان باشد، نگرش والدین مثبت خواهد بود و تصمیم به داشتن بچّه خواهند گرفت. بنابراین، لیبنشتاین برفرایند تصمیم ­گیری عُقلایی زوجین در مورد داشتن فرزند با توجّه به منافع و هزینه­ های فرزندان تأکید می​کند. او سه نوع منفعت و دو نوع هزینه را در مورد فرزندان مطرح می­ کند:
الف) منفعت فرزندان: به­ طور کلّی فرزندان در سه زمینه می­توانند منشاء سود و منفعت برای والدین خود باشند: نخست، فرزند به­عنوان کالایی که می ­تواند منبع لذّت برای والدین باشد­،­(کالای مصرفی). دوّم، فرزند به­عنوان نیروی­کاری که می­توان از آن به­ طور مجّانی در فعّالیت­های کشاورزی و دامداری استفاده نمود و سوّم، تأمین و نگهداری والدین در سنین کهولت یا وضعیّت­های دیگر مثل بیماری یا از کار افتادگی.
ب) هزینه­ فرزندان: که خود به دو نوع هزینه­ های مستقیم و غیرمستقیم، تقسیم می­ شود. با تولد بچّه والدین باید در مواردی چون؛ تعلیم وتربیّت و آموزش فرزندان و نیز نگهداری و مراقبت از آن​ها تا زمانی که به مرحله­ منفعت اقتصادی برسند،­به­ طور مستقیم هزینه نمایند. هزینه­ های غیرمستقیم نیز مربوط به فرصت­هایی است که مادر به خاطر نگهداری طفل خویش از دست خواهد داد. لیبنشتاین استدلال می­ کند که چنانچه منافع اقتصادی فرزندان بیش​تر از هزینه­ های دو گانه مذکور باشد، زوجین انگیزه­ داشتن فرزندان بیش​تری را در سر می­پرورانند. او بر این باور است که در یک جامعه رفتارهای باروری ناشی از یک رفتار اقتصادی عُقلایی است(حسینی،۹۵:۱۳۸۶).
. شکل ۳-۱، مدل تحلیلی تبیین باروری بر اساس نظریه­ هزینه­ها و منافع فرزندان

۳-۱-۳) چارچوب عرضه و تقاضا و هزینه­ های تنظیم باروری

استرلین^[۱۹]، از تحلیل­گران اقتصادی باروری است که تلاش نمود تا با پیوند عوامل اقتصادی و اجتماعی و ارائه­ مدلی با چارچوب فکری وسیع­تر، نظریه­ جامع­تری برای تبیین تحوّلات باروری ارائه دهد. در مدل استرلین، که به نظریه­ عرضه و تقاضا و هزینه­ های تنظیم باروری یا به­ طور خلاصه چارچوب عرضه و تقاضا شهرت یافته است، پدیده­ باروری در قالب سه عامل تعیین­کننده­ بلافصل عرضه­ی فرزند، تقاضا برای فرزند و هزینه­ های تنظیم باروری،­(مالی، جسمانی و اجتماعی)­،­تبیین شده است. استرلین در چارچوب نظریه­ عرضه و تقاضا استدلال می​کند که سطح باروری در یک جامعه به وسیله­ انتخاب­های صورت­ گرفته توسّط زوجین در زمینه ­های فرهنگی و خانوادگی­شان صورت می­گیرد. والدین سعی می​کنند تعادلی میان قابلیّت عرضه­ی فرزند، توان فیزیکی زاد و ولد زنان، تقاضا برای بچّه و شمار کودکان زنده­ی ایده­آل برقرار نمایند. این نظریه دارای یک متغیّر وابسته­ی نهایی به نام فرزندان زنده متولّد شده می­باشد که خود تحت تأثیر متغیّرهای دیگری به شرح زیر است:
الف) تقاضا برای کودکان یا بُعد مطلوب خانوار، C_d: استرلین در مورد شمار فرزندان مطلوب یا مورد نظر خانواده­ها که آن را با C_d نشان می​دهد، ارتباط دو متغیّر را مهم قلمداد می­ کند: نخست، مخارج فرزندان که جنبه اقتصادی دارد و دوّم، تمایلات ذهنی والدین که در ارتباط با مجموعه​ای از عوامل اجتماعی، فرهنگی و روانی است (ویکس، ۱۳۹۰: ۴۴۳). از نظر استرلین چهارگروه اصلی از عواملی که بر بُعد مطلوب خانوار تأثیر می­گذارند عبارتند از: هزینه­ها و منافع مستقیم کودکان، هزینه­ های زمان کودکان، درآمد و ثروت و سلیقه­ها و ترجیحات ذهنی مثل هنجارهای مربوط به بُعد خانوار یا کیفیّت فرزندان. تغییرات در این عوامل باعث تفاوت­هایی در تقاضا برای بچّه در میان خانوارها در یک زمان معیّن یا یک خانوار معیّن در طول زمان خواهد شد. اگر زوج­ها سلیقه­های متفاوتی درباره بُعد مطلوب خانوار داشته باشند، فرایند تصمیم ­گیری پیچیده­تر می­ شود (حسینی، ۱۳۹۰: ۱۲۸).
ب) عرضه­ی فرزند یا پتانسیل بُعد خانوار، C_n: یعنی شمار کلّ فرزندانی که زوجین در طول زندگی زناشویی بدون استفاده از روش­های پیش­گیری از حاملگی به دنیا می​آورند. این ظرفیّت تحت تأثیر عوامل زیستی و فرهنگی قرار دارد. استرلین بر این باور است که عرضه­ی فرزند،­که آن را با C_n نشان می­دهد، متأثر از مرگ­و­میر جامعه است؛­زیرا در جامعه​ای که سطح مرگ­ومیر بالاست شمار کم­تری از فرزندان زنده می­مانند. بر همین اساس، استدلال می­ کند که در شرایطی که سطح مرگ­و­میر بالاست، هیچ نیازی به تنظیم باروری وجود نخواهد داشت. به این ترتیب، می­توان گفت که در شرایط گذشته با سطوح بالای مرگ­و­میر، تقاضا برای فرزند بیش​تر از عرضه­ی فرزند بوده است، یعنی:
C_{d >} C_n
بر اساس دو قضیه­ی فوق استرلین استدلال می­ کند که چنانچه تقاضا برای فرزند^[۲۰] بیش​تر از عرضه­ی فرزند باشد هیچ نوع توجّهی به کنترل موالید صورت نخواهد گرفت؛­زیرا محدودیّتی برای تولّد فرزند اضافی وجود ندارد. در مقابل، چنانچه ظرفیّت تولید و عرضه به دلیلی چون افزایش نسبت بازماندگی در میان کودکان واطفال و یا افزایش هزینه­ های فرصت، بیش​تر از تقاضا باشد، والدین دچار محدویّت می­شوند، از این رو انگیزه­ لازم را برای جلوگیری از تولّد فرزندان ناخواسته پیدا کرده و از روش​های پیش­گیری استفاده خواهند نمود. در بستر توسعه اقتصادی ـ اجتماعی سده­های نوزده و بیست میلادی، جوامع به وضعیّتی رسیدند که تقاضا برای فرزند کم­تر از عرضه­ی فرزند بوده است؛­زیرا در مسیر توسعه و انتقال از کشاورزی سُنّتی به اقتصاد پیشرفته، فرزندان به­عنوان کالای سرمایه​ای به­تدریج اهمیّت خود را از دست دادند و در نتیجه، تقاضا برای فرزند کاهش یافت (حسینی، ۱۳۸۶: ۹۹). به بیان دیگر:
C_{d <} C_n
ج) هزینه­ های تنظیم باروری یا موانع و مخارج کنترل موالید: استرلین این هزینه­ها را ناشی از دو دسته از عوامل می­داند که عبارتند از:
۱) هزینه​های مادّی ^[۲۱]که مربوط به دسترسی انسان به وسایل کنترل موالید و فراگیری روش​های جلوگیری از حاملگی می­ شود. برنامه­ی تنظیم خانواده به­ طور معمول هزینه­ های مادّی را با افزایش اطلاعات زوجین و ارائه­ خدمات رایگان کاهش می­دهد.
۲) هزینه​های ذهنی و روانی باروری^[۲۲] یا جنبه­ ذهنی مربوط به پذیرش کنترل موالید که خود به مجموعه​ای از عوامل اقتصادی ـ اجتماعی و فرهنگی یک جامعه بستگی دارد. این هزینه­ها را نیز با مشروعیّت بخشیدن به عمل کنترل باروری کاهش می­ دهند.
کنترل آگاهانه­ی باروری بستگی به تفاوت بین پتانسیل بُعد خانوار، C_n، و بُعد مطلوب خانوار، C_d، دارد. اگر موازنه­ی C_n – C_d منفی باشد، خانوار قادر نیست به بُعد مطلوب و مورد نظر خود دست بیابد. در نتیجه، انگیزه برای به دنیا آوردن فرزند بیش​تر می­ شود. اگر حاصل این موازنه مثبت باشد، تقاضا کمتر از عرضه باشد، والدین با فرزندان ناخواسته مواجه می­شوند و انگیزه­ لازم را برای کنترل موالید به­دست می­آورند. استرلین بر این باور است که در بستر توسعه، فرزندان به­عنوان کالای سرمایه­ای به تدریج اهمیّت خود را از دست می­ دهند و در نتیجه، برخلاف گذشته، تقاضا برای فرزند فروکش می­ کند (استرلین، ۱۹۷۵). او، برخلاف سایر اقتصاددانان نئوکلاسیک، تلاش کرد تا با وارد کردن متغیّر موانع و مخارج کنترل موالید در مدل خود صبغه­ای جامعه­شناختی نیز به آن بدهد. بر همین اساس می­گوید وقتی هزینه­ های تنظیم باروری بالا باشد، هیچگونه کنترل عمدی بر باروری اعمال نخواهد شد. در نتیجه، بُعد خانوار بزرگ­تر از بُعد مطلوب و ایده­آل خانوار خواهد شد. کنترل عمدی باروری تنها در شرایطی صورت می­گیرد که هزینه­ های تنظیم باروری نسبتاً پایین و بُعد خانوار مطلوب و مورد انتظار برابر با تقاضا برای فرزندان باشد. در واقع، استرلین نشان داد که چگون نوسازی می ­تواند از طریق ترکیبی از نیروهای عرضه، تقاضا و هزینه­ های تنظیم باروری رفتارهای باروری را شکل دهد (حسینی، ۱۳۹۰: ۱۲۹).
شکل ۳-۲) چارچوب عرضه، تقاضا و هزینه­ های تنظیم باروری، مدل استرلین

۳-۱-۴) رویکرد تبیین نهادی

طرفدارن این دیدگاه استدلال می­ کنند که تغییرات در ساختارهای اقتصادی یا تغییرات در آگاهی و ایده­ ها اساساً از طریق تغییرات در نهادهای سیاسی، مذهبی، اقتصادی و اجتماعی صورت می­گیرد. مک­نیکل^[۲۳] باروری را از دو دیدگاه تبیین می­ کند: ۱) دیدگاهی که به تأثیر سیاست­های جمعیّتی و نهادهای مختلف بر باروری می ­پردازد که به دیدگاه بالا به پایین معروف است و ۲) دیدگاهی که به بررسی رفتارهای باروری در سطح خانواده می ­پردازد و به دیدگاه پایین به بالا معروف است. چارچوب تبیین نهادی هر دو دیدگاه را در نظر می­گیرد.
مک­نیکل می­گوید باروری هم یک پدیده­ زیستی و هم یک پدیده­ نهادی است. بنابراین، بایستی آن را با توجّه به بافت نهادی آن مطالعه کرد، زیرا منحصر به فرد بودن بافت نهادی هر جامعه باعث می­ شود تا واکنش جمعیّت­شناختی جوامع به تغییرات حاصله در شرایط اقتصادی اجتماعی و سیاسی جوامع منحصر به فرد باشد. مک­نیکل نقش دولت را مهم ارزیابی می­ کند و می­گوید دولت می ­تواند از راه ­هایی چون؛ افزایش هزینه­ های باروری، ایجاد زمینه ­های اجرایی و نقش و قانونی برای جامعه­ مدنی، فعّالیت­ اقتصادی و زندگی خانوادگی، افزایش هزینه­ های فرصت و … رفتار باروری را در جامعه تحت تأثیر قرار دهد. او به نقش دولت و سیاست­گذاران در اجرای بهتر برنامه­ ها و کیفیّت خدمات اشاره نموده و می­گوید: بدون شک رهبر یا سایر مقام­ها می­توانند نقش مهمّی در اجرای برنامه­ ها و سیاست­های ضروری و کیفیّت بهتر خدمات داشته باشند.
در بررسی رفتار باروری باید به جزئیات کشور و منطقه نیز توجّه شود، زیرا ساختار اجتماعی و فرهنگی در متن خاصّ هر جامعه معنی می­یابد. مک­نیکل کاهش باروری را بیش­تر متأثر از شرایط اقتصادی اجتماعی و فرهنگی حاکم بر جامعه می­داند و بر این باور است که باروری به طور محدود در معرض عملکرد سیاسی مستقیم است. بر این اساس، تنها سیاست­های مستقیم دولت را باعث گذار باروری در جامعه نمی­داند، بلکه معتقد است که عوامل دیگری نیز در کاهش باروری تأثیر می­ گذارد که از جمله آن­ها به نوسازی و رشد اقتصادی اشاره می­ کند. تغییر شکل اقتصادی خانواده، بهبود و پیشرفت وضعیّت و موقعیّت زنان در خانواده و اقتصاد و تغییرات عمده­ی فرهنگی در کاهش باروری تأثیر گذارند (حسینی، ۱۳۹۰: ۱۳۰).

۳-۱-۵) نظریه­ جریان ثروت بین نسلی

کالدول^[۲۴] در قالب نظریه­ جریان ثروت بین نسلی^[۲۵] به تلفیق رویکردهای اقتصادی و جامعه شناختی به منظور تبیین باروری پرداخته است. او بر این باور است که برای درک انتقال و کاهش باروری باید به ماهیّت جوامع توجّه کنیم. و در این راستا دو دسته از جوامع را از یکدیگر تمیز می­دهد (شکل زیر). دسته اوّل، جوامع سُنّتی است که در شرایط باروری طبیعی به سر می­برند و ارزش بالایی برای فرزندان قائل​اند (به کمّیت فرزندان اهمیّت می­ دهند و فرزندان دارای منافع اقتصادی هستند). دسته دوّم جامعه­ جدید مبتنی بر اقتصاد مدرن است. در این دسته از جوامع باروری در شرایط کنترل شده است و ارزش پایینی از نظر اقتصادی به فرزندان داده می­ شود (به کیفیّت فرزندان اهمیّت داده می­ شود و آن​ها دارای بار اقتصادی​اند). کالدول هر دو نوع رفتار باروری را عُقلایی می­داند زیرا با شرایط جامعه همخوانی دارد. او استدلال می­ کند که در جوامع سُنّتی، جریان​های ثروت رو به بالا و از نسل­های جوان­تر به نسل­های سالخورده­تر است. زیرا در جوامع سُنّتی فرزندان منبع درآمد خانواده محسوب می­شوند، حال آنکه در جوامع مدرن همراه با گسترش سواد و توجّه به کیفیّت فرزندان جریان​های ثروت رو به پایین و از والدین به فرزندان است (اکرمن و و شنگه^[۲۶]، ۱۹۹۸: ۱۹۸).
این وضعیّت (معکوس شدن جریان ثروت) زمانی پیش می ­آید که در جریان نوسازی نظام خانواده از شکل گسترده به خانواده­ی هسته­ای تغییر شکل می­دهد و در نتیجه، روابط عاطفی و اقتصادی میان نسل­ها ضعیف می­ شود. در این شرایط چون والدین هستند که باید ثروت خالص را به فرزندان انتقال دهند، بنابراین ترجیح می­ دهند فرزندان کم­تری داشته باشند. کالدول هسته­ای شدن خانواده را پیش­شرط معکوس شدن جریان انتقال ثروت می­داند که به نظر می­رسد نوسازی و توسعه اقتصادی و اجتماعی مقدّم بر آن باشد. در واقع، کالدول تغییر شکل خانواده، معکوس شدن جریان ثروت و کاهش باروری را به وسیله­ نیروهای فرهنگی و اقتصادی تبیین می­ کند. به این ترتیب، می­توان گفت اساس نظریه­ کالدول تغییر ارزش­ها و منافع اقتصادی فرزندان است. به­طورکلّی، کالدول پنج مکانیزم کاهش نیروی کار بالقوّه­ی فرزندان، افزایش هزینه­ های آموزشی فرزندان، افزایش اهمیّت سرمایه ­گذاری برای فرزندان، تغییر فرهنگی و توسعه ارزش­های طبقه­ی میانی غرب در زمینه­ خانواده­ی هسته­ای فرزند محور^[۲۷] را باعث کاهش میزان باروری می­داند (حسینی، ۱۳۹۰: ۱۲۷).
شکل ۳-۳) تبیین کاهش باروری در نظریه­ جریان ثروت بین نسلی

۳-۱-۶) نظریه­ برابری جنسیّتی^[۲۸]

Extention: دمایی که در آن پلیمرازسیون با آنزیم DNA پلیمراز انجام می گیرد.
فصل دوم
مروری بر تحقیقات انجام شده
۲-۱-تاریخچه باکتری انتروکوک
در سال ۱۸۹۹ تی یرسیلین واژه انتروکوک را برای بیان توصیف ارگانیسم های کوچک جفت یا تک زنجیره ای کوتاه که در مدفوع دیده شدند، انتخاب کرد. مشاهداتی در مورد خصوصیات رنگ آمیزی گرم، آرایش سلولی، شکل و فقدان کاتالاز، انتروکوک ها را به عنوان اعضا جنس استرپتوکوک معرفی نمود.

(( اینجا فقط تکه ای از متن درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. ))

درسال ۱۹۳۳ با توجه به سیستم گروه بندی لانسفیلد، انتروکوک ها از لحاظ آنتی ژن اختصاصی در گروهD قرار دارند(روف^[۴] ،۱۹۹۰ ). ربکا لانسفیلددر رده بندی پیشنهادی خود، دریافت که اگراسترپتوکوک را در محیط کشت مایع با۲=pH قرار دهد و به مدت ۱۰ دقیقه در گرمای ۱۰۰ درجه سلسیوس نگه داری کند، ماده- ی آنتی ژنی محلولی از جنس هیدرات کربن از دیواره ی باکتری خارج می شود که آن را کربوهیدرات C نامید و آنتی ژن آن را به گروه های A تاE تقسیم بندی کرد. تمام اعضای جنس انتروکوک با آنتی سرم گروه D لانسفیلد واکنش می دهند (کاروالهومدا و همکاران^[۵]، ۲۰۰۰؛ فاکلم^[۶]، ۲۰۰۲).
درسال های بعد با به کارگیری تکنیک های جدید طبقه بندی، نظیر دورگه سازی DNA، جنس استرپتوکوکوس به سه گروه تقسیم گردید:
جنس استرپتوکوکوس که تعداد وسیعی از گونه ها شامل استرپتوکوک های پیوژنیک، استرپتوکوک های ویریدانس و پنوموکوک را در بر می گیرد.
جنس انتروکوک شامل انتروکوک های گروه D یا استرپتوکوک های مدفوعی.
جنس لاکتوکوک یا استرپتوکوک های اسیدلاکتیک که حاوی آنتی ژن N لانسفیلد هستند.(روف، ۱۹۹۰؛ کنمان و همکاران^[۷]، ۱۹۹۲)
نام انتروکوکوس(^[۸]E) فکالیس توسط اندرووهوردر در سال ۱۹۰۶ برای ارگانیسم هایی با منشا مدفوعی که توانایی انعقاد شیر،عدم توانایی تخمیر رافینوز،تخمیر مانیتول و لاکتوزرا داشت،به کاربرده شد. (فاکلم،۲۰۰۲). جنسون، انتروکوکوس فاسیوم را متمایز از انتروکوکوس فکالیس از نظر الگوی تخمیری شرح داد.
ووینگ،استرپتوکوکوس دورانس را با فعالیت تخمیری کمتری نسبت به استرپتوکوکوس فاسیوم معرفی کرد.(موالرینگ و گیلمور^[۹]،۲۰۰۷؛ اومباندانزا موسا و همکاران^[۱۰]، ۲۰۰۲).
در سال ۱۹۸۴ جنس انتروکوکوس نخستین بار توسط چلیپر و کلیفرا از استرپتوکوک ها جدا شد.جنس انتروکوک فقط دارای آنتی ژن D است که جز فلور نرمال دستگاه گوارش انسان می باشد.گونه های دیگری که دارای آنتی ژن گروهD می باشند قسمتی ار فلورنرمال روده را تشکیل می دهند.(لی،۱۹۷۲؛ ام سی برید و همکاران^[۱۱]، ۲۰۰۷).
امروزه این جنس، گونه های مختلفی را در خود جای می دهد که تعداد آن ها در منابع مختلف از ۱۷ تا ۲۱ گونه متغیر بوده(فاکلام،۲۰۰۲؛ گارماشوا و کووالنکو^[۱۲]،۲۰۱۰) و در ۵ گروه اصلی قرار می گیرند(گارماشوا و کوالنکو،۲۰۱۰).دو گونه شایع آن ها انتروکوکوس فکالیس و انتروکوکوس فاسیوم می باشد اما گزارش هایی به ندرت مبنی بر مشـــــاهده سایر گــــونه ها در عفونت های انسانی دیده شده است که از انواع آن می توان به
E.durans, E.avium, E.gallinarum, E.munstii, E. flavescens, E.hirae, E. raffinosus, E. casseliflavus اشاره نمود (کوالنکو،۲۰۱۰؛ وینست و همکاران^[۱۳]،۱۹۹۲؛ کاروالهو و همکارانش، ۲۰۰۰؛ گارماشوا، ۲۰۰۴). در مناطق مختلف دنیا حضور این گونه ها، متفاوت بوده است و در مواردی دو گــــــــونه

1. 1. casseliflavus و gallinarrum .Eبیشترین گونه پس از E. faecuimو E. faecalis گزارش شده است (فرانز و همکاران^[۱۴]، ۱۹۹۹).

۲-۲-تاکسونومی
براساس توالی SrRNA 16 گونه های انتروکوک در چندین گروه قرار گرفته اند.(کاردن و سالمن لیلجا^[۱۵]،۲۰۱۳، ریو و همکاران^[۱۶]، ۲۰۱۳).
۱٫گروه انتروکوکوس فکالیس :شامل انتروکوک های فکالیس، هموپراکسیداز و موراونسیس
۲٫گروه انتروکوکوس فاسیوم: شامل انتروکوک های فاسیوم، دورانس،هیره،موندتی،پورکینز و ویلوروم
۳٫گروه انتروکوکوس آویوم: شامل انتروکوک های آویوم،پسودوواریوم،مالودوراتوس و رافینوزوس
۴٫گروه انتروکوکوس کاسلی فلاووس:شامل انتروکوک های کاسلی فلاووس، گالیناروم،فلاووس
۵٫گروه انتروکوکوس سکوروم:شامل انتروکوک های سکوروم و کلومبا
۶٫گروه انتروکوکوس دیسپار: شامل انتروکوک های دیسپار و اسینی
۷٫گروه ساکارولیتیکوس :شامل انتروکوک های ساکارولیتیکوس و سولفوروس
گروه اول قادر به تولید اسید در محیط مانیتول براث و هیدرولیز آرژینین داشته اما سوربوز منفی می باشند. انتروکوکوس فکالیس در این دسته قرار می گیرد. این گونه مسئول ۹۰-۸۵% عفونت های انتروکوکی انسان است. علاوه بر روده ی انسان، در دستگاه گوارش گوساله، مرغ، اسب، گوسفند، خوک نیز یافت می شود.منفی بودن تست آرابینوز وجه تمایز گروه اول با دیگر اعضای گروه دوم است. تعدادی از واریانت هاقادر به تحمل تلوریت و استفاده از پیرووات می باشند.
گروه دوم قادر به تولید اسید در محیط مانیتول و سوربوزبراث را داشته، ولی قادر به هیدرولیز آرژینین نمی‏باشد.
گروه سوم توانایی تشکیل اسید را در محیط مانیتول براث و سوربوز اسید ندارد، ولی آرژینین را هیدرولیز می‏کنند. واریانت های مانیتول منفی وانتروکوکوس فکالیس در این گروه قرار دارند. درواریانت های غیر شایع انتروکوکوس فکالیس که مانیتول منفی و پیرووات مثبت می باشند، آرابینوز، رافینوز و سوکروز منفی می باشد. انتروکوکوس فاسیوم مانیتول منفی نیز تنها عضو این گروه است که قادر به استفاده از آرابینوز می باشد.
گروه چهارم از سه گونه تشکیل شده که از نظر تشکیل اسید در محیط حاوی سوربوز و مانیتول براث مثبت بوده و هیدرولیز آرژینین آن منفی می‏باشد. هیچ‏کدام از گونه‏های انتروکوکوس فکالیس در این گروه قرار ندارد.
گروه پنجم، شامل گونه های انتروکوکوس گالیناروم، انتروکوکوس کاسلی فلاووس، انتروکوکوس کولومبا و انتروکوکوس فکالیس هستند. البته انتروکوکوس کولومبا مشابه واریارانت های آرژینین منفی و انتروکوکوس فکالیس می‏باشد و با تشکیل اسید در محیط رافینوز براث از انتروکوکوس فکالیس متمایز می‏شوند.
۲-۳-فاکتورهای بیماری زایی
انتروکوک ها به علت مقاومت آنتی بیوتیکی به عنوان یکی از مهم ترین عفونت های بیمارستانی به شمار می‏آیند که این مقاومت در کنار فاکتورهای ویرولانس ذاتی، با هم به صورت مستقل در ایجاد بیماری نقش دارند(جت و همکاران^[۱۷]،۱۹۹۴). می توان گفت حضور همین فاکتورهای ویرولانس است، که با وجود حساسیت بیشتر انتروکوکوس فکالیس در مقایسه با انتروکوکوس فاسیوم نسبت به آنتی بیوتیک ها، آن ها را به گونه غالب در ایجاد عفونت های انتروکوکی تبدیل کرده است( جوهانسون و راسموسن^[۱۸]، ۲۰۱۳) انتروکوکوس فکالیس دارای فاکتورهای ویرولانس متعددی همچون سیتولیزین، محصولات سوپر اکسید خارج سلولی، انتقال پلاسمید های حساس به فرمون و یک پروتئین سطحی متصل شونده، از انواع پروتئین سطحی انتروکوکی(ESP^[19]) که به تازگی شناسایی شده و به منظور کلنیزه نمودن موفقیت آمیز بیماران ضروری می باشند، تقریبا می توان گفت تنها ویژگی های انتروکوکوس فکالیس ESP، سیتولیزین و مواد تجمعی می باشد(جوهانسون و راسموسن، ۲۰۱۳).
۲-۳-۱-مواد تجمعی
در پاسخ به فرمون های تولید شده توسط سایر انتروکوک ها، سویه های خاصی از انتروکوک ها فرمون سرم ایجاد می کنند. مواد تجمعی سبب اتصال این ارگانیسم ها به سلول های توبولاری کلیوی شده و در گسترش عفونت ادراری نقش مهمی بازی می کنند(موالرینگ^[۲۰]،۱۹۹۲)، همین طور سبب اتصال سلول باکتری دهنده و گیرنده برای انتقال پلاسمید می گردند(فلاناگان و همکاران^[۲۱]،۲۰۰۸). به علاوه این مواد در زنده ماندن انتروکوکوس فکالیس در پلی مورفونوکلئوها به دنبال فاگوسیتوز نقش دارند(داو و همکاران^[۲۲]،۲۰۱۲) و موجب وارد شدن انتروکوک ها از طریق سلول های اپی تلیال روده می شود.(استک و همکاران^[۲۳]،۲۰۱۱). مواد تجمعی و سیتولیزین به طور سینرژیسم از طریق کوآروم سنسینگ با تنظیم ترشح سیتولیزین منجر به آسیب وسیع بافتی بیماران مبتلا به اندوکاردیت می گردند.
۲-۳-۲-سیتولیزین
حضور سیتولیزین در ۶۰% سویه های انتروکوکوس فکالیس به صورت لیز گلبول های قرمز در محیط کشت مشاهده شده است.این فاکتور می تواند از طریق پلاسمیدها کونجوگه به باکتری های دیگری منتقل می‏گردد(کوبرن و گیلمور^[۲۴]،۲۰۰۳).
آزمایش ها نشان می دهد که وجود این فاکتور ویرولانس در سویه های مولد باکتریمی، سبب افزایش مرگ و میر تا ۵ برابر می گردد(کوبرن و گیلمور،۲۰۰۳). از سیتولیزین انتروکوکوس فکالیس، به عنوان یک توکسین منحصر به فرد باکتریایی یاد می گردد( ون و همکاران^[۲۵]، ۲۰۱۳).قبلا نیز اشاره نمودیم که حضور همولیزین در سویه های با مقاومت به سطح بالای جنتامایسین(HLGR)، وضیعت بیماررا حادتر می کند(ارلندسن و ولز^[۲۶]،۱۹۹۴). به عنوان مثال در دهه ی ۱۹۸۰ آزمونی توسط هوک و همکارانش انجام شد، معلوم گردید که میزان خطر در این سویه ها ۵ برابر سویه های فاقد همولیزین است. پس از آن کابالرو و همکاران دریافتند که حساسیت یا مقاومت این سویه ها به جنتامایسین تاثیری در شدت بیماریزایی ندارند و این فاکتور همولیزین است که در افزایش بیماریزایی نقش دارد (کابالرو گرانادو و همکاران^[۲۷]،۱۹۹۸).
۲-۳-۳-ژلاتیناز
یکی دیگر از انواع فاکتورهای ترشحی،ژلاتیناز می باشد که نقش مهمی در بیماریزایی و ایجاد عفونت ها و بیماری های انتروکوکی دارد(ورجیس و همکاران^[۲۸]،۲۰۰۲). در سال ۱۹۸۸ دوپونت^[۲۹] و همکارانش طی مطالعاتی، نشان دادند که ژلاتیناز و تولید آن در سویه های انتروکوکی باعث کاهش مقدار۵۰LD برای موش های آزمایشگاهی می گردد. نتایج نشان می دهد انتروکوک های جدا شده از مدفوع بیماران و سویه های مولد اندوکاردیت به ترتیب ۲۷% و ۵۰% دارای این فاکتور بیماریزا می باشند (موهلر و کاربن، ۱۹۹۸).
۲-۳-۴-فرمون
درواقع فرمون ها پپتیدهای کوچکی هستند (۸-۷ اسیدآمینه) که از طریق لقاح^[۳۰] توسط انتروکوکوس فکالیس برای افزایش انتقال پلاسمید در بین سویه ها ترشح می گردند. این پپتید ها از طریق کروموزوم کد می شوند. هر پلاسمید پاسخ دهنده به فرمون می تواند یک پپتید ترشحی را نیز کد کند که به عنوان یک مهارکننده رقابتی برای فرمون در نظر گرفته می شود(ان و کلول^[۳۱]،۲۰۰۲). مطالعات اخیر نشان داده است که برخی از فرمون ها به عنوان مهار کننده های خودشان عمل می کنند. اغلب این مهار کنندگان جذب شیمیایی نوتروفیل ها همراه با ترشح آنزیم های گرانولی و القاء انفجار تنفسی هستند(فلانگان و ان^[۳۲]، ۲۰۰۲).
۲-۳-۵-لیپوتیکوئیک اسید
یکی دیگر از فاکتورهای موثر در ایجاد بیماری این گونه از باکتری ها لیپوتیکوئیک اسید می باشد که خصوصیات بیولوژیکی متعددی برای آنها شناسایی شده است. در واقع مشخص شده است که اسید لیپوتیکوئیک به طور قابل برگشتی به اریتروسیت های انسانی متصل می شود و مشخص شده است که آزاد- سازی اینترلوکین شش و α-TNF را از مونوسیت های انسانی القا می نماید(وندلبو و پائولسن^[۳۳]، ۲۰۰۴).
۲-۳-۶-همولیزین انتروکوکوس فکالیس
تحقیقات نشان داه است درصد زیادی از ایزوله های کلینیکی انتروکوکوس فکالیس دارای این فاکتور هستند که قادر به تولید همولیزین به عنوان یک پروتئین سیتولیتیک می باشند. اریتروسیت های انسان، خرگوش و اسب را هیدرولیز کرده ولی روی اریتروسیت های گوسفند تاثیری ندارند(فیفادارا و همکاران^[۳۴]،۲۰۰۳، رودریگوس و تورس^[۳۵]،۲۰۰۶). سیتولیزین معمولا توسط پلاسمیدهای قابل انتقال کد می گردد، ولی گاهی ژن های سیتولیزین در عناصر کروموزومی نیز دیده می شوند(فیفادارا و همکاران، ۲۰۰۳).

که در آن D بر ماتریس متغیرهای مجازی (شکل دهنده عرض از مبدأهای متفاوت در شکل ماتریسی و رگرسیون فوق الذکر) و e به بردار خطاهای OLS اشاره دارد(گجراتی،۱۳۸۳).
روش های تخمین ارتباط بین متغیرهای تحقیق:در بخش آمار استنباطی و جهت توضیح روابط بین متغیرها، از آزمون های رگرسیون چندگانه استفاده خواهد شد. این آزمونها از طریق نرم افزار آماری EVIEWS و در سطح اطمینان ۹۵% اجرا می شود. برای آزمون فرضیات تحقیق، ابتدا متغیرهای اساسی اندازه گیری می شوند. اندازه گیری متغیرها در محیط نرم افزار Excel و از طریق تابع های این نرم افزار انجام می شود. سپس روابط بین متغیرهای بدست آمده با بهره گرفتن از آزمون های رگرسیونی بررسی می شود.

( اینجا فقط تکه ای از متن فایل پایان نامه درج شده است. برای خرید متن کامل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. )

ب) مدل تحقیق و مولفه های آن
۱) مدل مفهومی تحقیق
مدل تحقیق حاضر، بر اساس تحقیق گالمور و لابرو(۲۰۱۴) و با توجه به مطالب شرح داده شده در انتهای فصل دوم می باشد.
۲) رابطه کلی
در این تحقیق، فاصله مالیاتی به عنوان متغیر وابسته و کیفیت گزارشگری مالی به عنوان متغیر مستقل اساسی موردنظر می باشد. در مدل آزمون فرضیات، متغیرهای استراتژی تنوع و شرایط عدم اطمینان به عنوان سایر متغیرهای مستقل، موردنظر قرار گرفته اند. بنابراین مدل کلی برآوردی تحقیق حاضر بصورت ذیل می باشد:
y =f (x1,x2,x3,x4,x5, x6,x7,x8,x9)
۳) تعریف متغیرها
Y : فاصله مالیاتی
x1: کیفیت گزارشگری مالی
x2: استراتژی تنوع
x3: شرایط عدم اطمینان
x4: ضریب بتا(شاخص ریسک سیستماتیک)
x5: نرخ رشد فروش
x6: نوسانات سود قبل از مالیات
x7: اقلام تعهدی اختیاری
x8: نسبت موجودی کالا
X9: لگاریتم قیمت سهام
۴) دسته بندی متغیرها
y: متغیر وابسته
x1,x2,x3: متغیرهای مستقل
x4,x5, x6,x7,x8,x9: سایر متغیرهای مستقل
۵) اندازه گیری متغیرها
فاصله مالیاتی(y): در این تحقیق از اختلاف مالیات نقدی پرداخت شده و مالیات تعلق یافته و انحراف معیار ۵ ساله مالیات نقدی پرداخت شده، جهت اندازه گیری فاصله مالیاتی شرکتها استفاده شده است.
الف) اختلاف مالیات پرداخت شده و مالیات تعلق یافته: این اختلاف منعکس کننده فاصله بین مالیات پرداختی شرکت با مالیاتی است که متناسب با سود تحصیلی، باید پرداخت می کرد. هرچه این فاصله بیشتر باشد، نشان می دهد که شرکت از روشهایی برای پرداخت کمتر مالیات استفاده نموده است.
PTax: مالیات پرداختی توسط شرکت که در صورت سود و زیان سالانه به عنوان هزینه مالیات درج شده است.
RTax: مالیات واقعی شرکت که از طریق مالیات قطعی پرداخت شده(مندرج در یادداشت ذخیره مالیات) بدست آمده است.
EBIT: سود(زیان) قبل از مالیات
ب) انحراف معیار مالیات پرداختی: با توجه به اینکه انتظار می رود که درآمد شرکتها دارای یک پایداری نسبی است؛ هر چه نوسان مالیات پرداخت شده در طول سالهای متوالی بیشتر باشد، منعکس کننده استفاده آنها از روشهایی برای فاصله مالیاتی در برخی از سالها می باشد. برای محاسبه این متغیر از انحراف معیار ۵ ساله مالیات پرداختی استفاده شده است.
کیفیت گزارشگری مالی(x1): برای محاسبه این متغیر از دو معیار سرعت اعلان سود و دقت سود پیش بینی شده، استفاده شده است.
سرعت اعلان سود: پس از پایان سال مالی، هر چه مجمع عمومی زودتر تشکیل شود، دستیابی به اطلاعات مالی شرکت، سریعتر خواهد بود. بنابراین اختلاف زمانی بین پایان سال مالی با تاریخ مجمع عمومی(به روز)، هر چه کمتر باشد، سرعت اعلان سود و به تبع آن کیفیت اطلاعات بالاتر است.
IIQ(1)=Ln(اختلاف زمانی بین پایان سال مالی با تاریخ مجمع عمومی به روز)*(-۱)
دقت پیش بینی سود: هرچه قدر اختلاف بین سود پیش بینی شده هر سهم با سود تحقق یافته هر سهم، کمتر باشد، اطلاعات منتشر شده شرکت بیشتر به واقعیتهای اقتصادی نزدیک می باشند. جهت محاسبه این متغیر از رابطه زیر استفاده شده است.
PEPS: سود پیش بینی شده هر سهم
AEPS: سود تحقق یافته هر سهم
استراتژی تنوع(x2): نسبت درآمد فروش حاصل از بزرگترین کسب و کار شرکت به کل درآمدهای شرکت.
DIVER=P_it * Ln(
شرایط عدم اطمینان(x3): برای محاسبه این متغیر از میانگین انحراف معیار ۵ ساله درآمد فروش، جریان نقد عملیاتی و حقوق صاحبان سهام استفاده شده است.
ضریب بتا(x4) (شاخص ریسک سیستماتیک)
ریسک سیستماتیک(Beta) منعکس کننده رابطه بین تغییرپذیری بازده سهام شرکت با تغییرپذیری بازده بازار سهام می باشد. در این تحقیق، جهت محاسبه ضریب بتا از رابطه ذیل استفاده شده است(نوروش و دیلمی، ۱۳۸۴).

R_it: بازده کل سهام شرکت i دردوره t( شامل کلیه مزایای نقدی و تغیرات در قیمت سهام در دوره t )
R_m: بازده بازار سهام در دوره t
باید توجه داشت که ضریب بتای سالانه سهام شرکتهای نمونه آماری از طریق نرم افزار ره آورد نوین، محاسبه می شود و از محاسبات دستی، پرهیز می شود.
نرخ رشد فروش(x5)
نوسانات سود قبل از مالیات(x6)

روش پژوهش در کشف حقایق و شناخت مسائل، ضرورتی اجتناب ناپذیر است. از همین رو فلاسفه، علما و پژوهشگران رشته‌های مختلف علمی همواره در پی یافتن و ابداع روش‌های پژوهشی بوده اند که از صحت و اطمینان بیشتری برای رسیدن به حقیقت و تشخیص مسائل برخوردار است. معرفی روش شناسی، بخش مهمی از هر کار پژوهشی را تشکیل می دهد. در واقع آنچه یک پژوهش و نتایج آن را معتبر می سازد، بکارگیری مناسب ترین روش برای انجام آن می باشد(نادری و سیف نراقی، ١٣٨۵).

(( اینجا فقط تکه ای از متن درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. ))

اعتبار نتایج هر پژوهشی در بعد وسیعی متاثر از روش انتخاب شده برای آن می باشد و انتخاب این روش به عواملی چون ماهیت اهداف پژوهش، سوال‌ها، امکانات پژوهش و غیره بستگی دارد. در اصل پژوهش با یک یا چند سوال ویژه که اغلب اهدافی را در بر دارد، شکل می گیرد. برای یافتن پاسخ سوال‌ها که همانا دستیابی به اهداف پژوهش می باشند، داده‌ها از طرق مختلف جمع آوری و با ابزارهای متناسب تجزیه و تحلیل می شوند، از این رو در این فصل، روش پژوهش، جامعه آماری، حجم نمونه و روش نمونه گیری، روش جمع آوری اطلاعات، ابزار گردآوری اطلاعات، روایی و پایایی ابزار، متغیر‌های پژوهش، فرضیه‌ها و روش‌های مورد استفاده در تجزیه و تحلیل داده‌ها، معرفی خواهد شد. سعی بر آن است که اطلاعات دقیق و روشنی در مورد پژوهش ارائه شود تا هر پژوهشگر دیگری صرف نظر از زمینه فکری خویش، به راحتی بتواند این پژوهش را تکرار و نتایج مشابهی را کسب نماید.
روش تحقیق
پژوهش حاضر از لحاظ هدف کاربردی، از نظر شیوه گرد آوری داده‌ها از نوع تحقیقات توصیفی می باشد که از روش زمینه یابی بهره گرفته است.
تحقیق زمینه یابی یا پیمایشی عبارت است از مشاهده پدیده‌ها به منظور معنا دادن به جنبه‌های مختلف اطلاعات جمع آوری شده. زمینه یابی یک فرایند پژوهشی است که به منظور جمع آوری اطلاعات درباره این موضوع‌ها که گروهی از مردم چه می داند چه فکر می کنند و یا چه کاری انجام می دهند اجرا می شود(حسن زاده، ۱۳۸۹) .
جامعه آماری
جامعه آماری عبارت است از افراد یا واحد‌هایی که دارای حداقل یک صفت مشترک باشند(دلاور، ۱۳۸۳).
در این پژوهش جامعه آماری عبارتست از کلیه گلکاران مشغول به پرورش گل و گیاهان زینتی در شهرستان کرج در سال ۱۳۹۲، که بر اساس آمار جهاد کشاورزی این شهرستان این جامعه شامل ۱۴۰ نفر می باشد. جدول ٣-١، جامعه آماری را به تفکیک نوع تولید نشان می دهد:
جدول ٣-١: فراوانی و درصد فراوانی جامعه آماری

درصد فراوانی
فراوانی
نوع تولید
ردیف

۱۸ %

۲۵

آپارتمانی

۱

۸۲ %

۱۱۵

فضای باز

۲

۱۰۰ %
۱۴۰
مجموع

برآورد حجم نمونه و روش نمونه گیری
در این پژوهش به علت محدود بودن جامعه آماری، کل جامعه مورد بررسی قرار گرفت. از این رو، از روش سرشماری استفاده شد.
روش جمع آوری اطلاعات
در این پژوهش برای جمع آوری اطلاعات مورد نیاز از دو روش بهره گیری شده است:
الف) روش کتابخانه ای: جهت مطالعه مبانی نظری موضوع پژوهش و دستیابی به اطلاعات از طریق کتب، مقالات، پایان نامه‌ها و نشریات داخلی و خارجی و همچنین شبکه اینترنت، از این روش استفاده گردید.
ب) روش میدانی: در این روش با بهره گرفتن از پرسشنامه محقق ساخته، با در نظر گرفتن اهداف اختصاصی تحقیق، گویه‌های پرسشنامه در ابعاد مختلف طراحی شد که پس از طراحی، اصلاح و تائید روایی و پایایی آن، پرسشنامه نهایی در اختیار پاسخگویان قرار گرفت. پس از اجرای پرسشنامه‌ها در بین جامعه آماری، مجموع داده های خام جمع آوری شده به کامپیوتر وارد و از طریق نرمافزار آماری SPSS 19 مورد تحلیل قرار گرفته است.
ابزار گردآوری اطلاعات
پس از آنکه مفاهیم و فرضیه‌های تحقیق به طور دقیق شکل گرفت، قدم بعدی تهیه ابزار تحقیق برای جمع آوری اطلاعات است. در تحقیق حاضر، پرسشنامه تنها ابزار تحقیق بوده است که با توجه به مطالعات نظری، کتابخانه ای و مطالعه مقاله‌ها و پایان نامه‌های مختلف در قالب عوامل مطرح شده در چارچوب نظری و برای آزمون فرضیه‌ها، تدوین و به کار گرفته شد. پرسشنامه محقق ساخته این تحقیق از یک مقدمه و دو بخش به شرح زیر تشکیل شده است:
بخش نخست) مقدمه:
در این قسمت توضیح مختصری درباره پژوهش، جهت آشنایی آزمودنی‌ها با پرسشنامه و گویه‌های آن توضیحاتی ارائه شده است.
بخش دوم) سوالات جمعیت شناختی:
در سوالات این بخش سعی شده است که اطلاعات کلی و جمعیت شناختی در رابطه با آزمودنی‌ها نظیر جنسیت، سن و سطح تحصیلات جمع آوری گردد.
بخش سوم) سوالات اصلی:
در این قسمت دیدگاه و نظر پرورش دهندگان گل و گیاهان زینتی، در قالب ۳۳ گویه به شرح جدول ۳-۲، اندازه گیری می شود. هر گویه دارای مقیاس ۵ درجه ای لیکرت و دامنه تغییرات آن بصورت ۵-۱ می باشد. آزمودنی برای انتخاب گزینه خیلی کم ۱ امتیاز، کم ۲ امتیاز، متوسط ۳ امتیاز، زیاد ۴ امتیاز و خیلی زیاد ۵ امتیاز کسب می نماید. جدول ۳-۲، تناظر متغیر‌های پژوهش را با گویه‌های پرسشنامه نشان می دهد:

– گذاشتن بر روی یخ به مدت ۱۰ دقیقه.
– میکروفیوژ در rpm13000 به مدت ۵ دقیقه.
– انتقال محلول رویی به میکروتیوب ۲میلی لیتر جدید.
– میکروفیوژ در rpm13000 به مدت ۱۰ دقیقه.
– انتقال محلول رویی به دو میکروتیوب ۵/۱ میلی لیتر
– افزودن (۶۶/۰حجم) ایزوپروپانول سرد (۲۰-درجه) به هر تیوب.
– ۱۰ بار اینورت کردن به آرامی.
– گذاشتن تیوب ها در فریزر ۲۰- درجه به مدت ۳۰ دقیقه.
– سانتریفیوژ دو تیوب در rpm13000 به مدت ۱۰ دقیقه.
– اوت محلول رویی، افزودن ۵۰میکرولیتر اتانول ۷۰% به هر میکروتیوب و ۵ بار ضربه زدن با انگشت به آرامی.
– سانتریفیوژ در rpm13000 به مدت ۳ دقیقه.
– کشیدن تمامی محلول رویی با سمپلر و بازگذاشتن درب هر میکروتیوب به مدت ۲ دقیقه در دمای اتاق.
– افزودن ۵۰میکرولیتر آب مقطر به هر میکروتیوب و حل کردن رسوب در آن.
– یکی کردن محتویات دو میکروتیوب، افزودن ۱میکرولیتر محلول RNase(mg/ml10) به نمونه حاصله و ۵ بار ضربه زدن با انگشت به آرامی.
– انکوباسیون در دمای ۳۷ درجه به مدت ۱۵ دقیقه.
۳-۷- الکتروفورز
برای مشاهده اسیدهای نوکلئیک، ساده­ترین و رایج­ترین راه الکتروفورز بوده که طی آن، اسیدهای نوکلئیک در یک میدان الکتریکی، از قطب منفی به سمت قطب مثبت حرکت می­ کنند. دلیل این امر نیز شارژ منفی آنها به خاطر گروه ­های فسفات موجود درآنها است. علاوه بر آن، یک ماتریکس واجد منافذ با اندازه­ های معین نیز لازم است تا اسیدهای نوکلئیک را بر اساس اندازه شان عبور دهد. در این ماتریکس، مولکول­های با اندازه بزرگ­تر کندتر و مولکول­های با اندازه کوچکتر سریع­تر از داخل این منافذ عبور می­ کنند.

۳-۷- ۱ طرز تهیه ژل آگارز
برای الکتروفورز نمونه­های DNA، عموماً از الف) ژل آگارز و ب) بافر TBE استفاده شد.
بافر TBE، برای ساختن ژل و سیال هادی جریان الکتروفورز استفاده ­گردید.
۳-۷-۲ طرز تهیه بافر (۱X)TBE

EDTA

Boric acid

Tris

۷۵/۰گرم

۷۸/۲گرم

۹/۱۰ گرم

مواد مذکور را در ۸۰۰ میلی لیتر آب مقطر حل کرده و سپس با آب مقطر به حجم ۱۰۰۰میلی لیتر رسانده شد.
لازم به ذکر است که می­توان از بافر TBE (0.5X) نیز برای الکتروفورز استفاده کرد. به شرط آنکه ژل آگارز را نیز با همان غلظت از بافر TBE تهیه نمود که در این پایان نامه نیز تمامی ژل­های آگارز با TBE (0.5X) ساخته شد.
قبل از تهیه ژل آگارز، سینی مخصوص ژل را آماده و شانه مخصوص در سینی قرار داده شد. فاصله شانه تا کف سینی معمولاً باید ۲ تا ۳ میلی متر باشد. سپس بسته به ظرفیت سینی ژل برای ایجاد چاهک مناسب( مثلاً در اینجا ۴۰میلی لیتر) ، مقدار ۴/۰ گرم پودر آگارز را در ۴۰ میلی لیتر بافر TBE حل شد تا ژل ۱% فراهم شود. سپس روی شعله متوسط حرارت داده تا پودر آگارز حل شد و محلول کاملاً شفاف شد. حال کمی صبر کرده تا محلول کمی سرد شده(حدود ۵۵ درجه) و سپس ۱میکرولیتر از رنگ اتیدیوم بروماید(mg/ml10) به آن افزوده شد، ۱۰ بار بصورت عدد ۸ لاتین هم زده و در سینی ژل دارای شانه ریخته شد تا سرد شود. پس از اطمینان از بسته شدن کامل ژل، به آرامی شانه را از داخل آن درآورده و سینی حاوی ژل داخل تانک الکروفورز قرار داده شد. سپس ۵میکرولیتر از نمونه را با ۱میکرولیتر از لودینگ دای (X6) مخلوط و به آرامی از بالای چاهک به داخل آن ریخته شد.
۳-۸- بررسی بیان پروتئین porA با روش SDS-PAGE
یکی از روش های بررسی بیان پروتئین ، روش SDS-PAGE است که برای شناسایی و بررسی کیفیت و کمیت پروتئین مورد استفاده است. SDS-PAGE براساس روش پیشنهادی لاملی (۱۹۷۰) انجام گرفت. برای این منظور از استوک باکتری (که روش تهیه آن را در بالا توضیح داده شد) روی محیط کشت جامدال بی آگار حاوی امپی سیلین کشت خطی داده شد و در انکوباسیون ۳۷ درجه به مدت ۱۸ ساعت انکوبه گردید. سپس ۵ کلنی از پلیت تازه رشد کرده به ۲۰میلی لیتر ال بی براث آمپی سیلین دار تلقیح گردید و در انکوباتور شیکردار در دمای ۳۷ درجه ی سانتیگراد با دور rpm170 قرار گرفت. بعد از ۴ ساعت و پس از آنکه OD به ۸/۰رسید به آن IPTG اضافه شد( به ازای هر ۱میلی لیتر محیط کشت به ان ۲ میکرولیتر IPTG اضافه شد)سپس در همان لحظه یعنی ساعت صفر ۲ میلی لیتر از محتوای فلاسک در شرایط استریل به میکروتیوپ ۲ میلی لیتری انتقال داده شد. بعد نمونه درrpm 13000 به مدت ۵ دقیقه میکروفیوژ شد و محلول رویی کاملا تا قطره اخر دورریخته شد ورسوب به عنوان پروتئین تولید شده در ساعت صفر به یخچال منتقل شد و فلاسک ارلن مایر روی شیکر انکوباتور قرار گرفت.این کار(رسوب گیری باکتری هر ۱ ساعت یکبار) در ۵ ساعت متوالی انجام شد و به عنوان رسوب تولید شده ی باکتری در ساعات اول و دوم و سوم و چهارم و پنجم در نظر گرفته شد. حال برای بررسی بیان پروتئین در این ۵ ساعت ، روی ژل پلی اکریل آمید( SDS-PAG)
به شرح زیر الکتروفورز گردید.
–الکترفورز بر روی ژل پلی آکریل آمید– SDS-PAG
۳-۹- نحوه آماده سازی جایگاه ژل
پس از آماده سازی صفحات شیشه ای ،صفحات با گیره های مخصوص بسته شد و به صورت عمودی در محل نگه دارنده ی صفحات قرار گرفت.سپس برای تهیه ی ژل SDS-PAGE به سه نوع بافر که در زیر ذکر شده است نیاز است.
بافرهای مورد نیاز: در این روش به سه نوع بافر نیاز است:
الف) بافرجدا کننده ۱۲% :اجزا و مقادیر این بافر در جدول۳-۱ نشان داده شده است.
ب)بافر متراکم کننده ۶%: اجزا و مقادیر این بافر در جدول ۳-۲ نشان داده شده است.
ج)بافر تانک برای برقراری جریان:اجزا و مقادیر این بافر در جدول۳-۳ نشان داده شده است.
۳-۱۰- روش تهیه بافر جداکننده
ابتدا به استوک آکریل آمید و بیس آکریل آمید آماده شده تریس و SDS و آمونیوم پرسولفات (APS)به مقدار اشاره شده در جدول ۳-۱ اضافه شد ، سپس حجم محلول با ۸/۴ میلی لیتر آب مقطر به ۱۵ میلی لیتر رسانده شد و در آخر تمد^[۴۶] به مقدار ذکر شده در جدول۳-۱ اضافه گردیدپس از ترکیب مواد زیر، بافر جدا کننده حاصل شده توسط سمپلر در محل موردنظر (بین صفحات شیشه ای)قرار گرفت . پس از قرار گیری بافر جدا کننده بین صفحات شیشه ای ۱۵ دقیقه برای سفت شدن کامل ژل، فرصت داده شد.